定点突变阻止金黄色葡萄球菌α-溶血素溶血活性

• 作者: 代健 崔玉东 张丽萌 杨轩 樊自尧 陈战球
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 α-溶血素 定点诱变 原核表达 溶血活性
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 44-49,112
• 页数: 7页
• 分类号: S482
• 字数: 4997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2014.02.011

摘要

金黄色葡萄球菌分泌的α-溶血素是导致肺炎的重要致病因子.为进一步研究金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-hla)的分子致病机理以及对其进行免疫预防,对α-hla第35位氨基酸进行了定点突变.用聚合酶链式反应(PCR)技术,从S.aureus wood46株基因组中扩增出α-hla基因,再利用重叠延伸PCR技术,将第35位带正电荷的组氨酸(密码子为CAC)突变为非极性的亮氨酸(密码子为CTC).hlaH35L基因测序结果显示第35位的组氨酸突变为亮氨酸,构建的重组表达质粒pET-28a-c(+)/hla和pET-28a-c (+)/hlaH35L在E.coli BL21 (DE3)中得到表达,重组蛋白α-Hla及hlaH35L大小均为33.4 kDa,α-Hla引起兔红细胞溶血,hlaH35L未引起兔红细胞溶血.成功表达并获得了失去溶血毒性的重组蛋白hlaH35L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔玉东	黑龙江八一农垦大学生命技术学院	171	895	14.0	21.0
2	代健	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	1	3	1.0	1.0
3	樊自尧	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	2	4	1.0	2.0
4	杨轩	黑龙江八一农垦大学生命技术学院	3	9	2.0	3.0
5	张丽萌	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	3	6	2.0	2.0
6	陈战球	黑龙江八一农垦大学生命技术学院	1	3	1.0	1.0