转基因水稻EB7001S事件特异性检测方法的建立

• 作者: 肖国樱 邓力华 魏岁军
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 转基因水稻 抗除草剂 旁侧序列 事件特异性检测 基因型鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 621-631
• 页数: 11页
• 字数: 6299字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.05.011

摘要

随着越来越多的转基因作物及其产品进入人类生活的各个领域,准确、快速、高效的检测转基因作物及其产品成为转基因研究和安全管理的基本要求.为了建立抗两种除草剂转基因水稻(Oryza sativa)EB7001S的事件特异性检测方法,本研究利用高效热不对称PCR(high efficient thermal asymmetric interlaced PCR,hiTAIL-PCR)和长距离PCR法(long-distance PCR,LD-PCR)扩增获得了转基因水稻EB7001S中外源基因插入位点的旁侧序列,其中:右旁侧序列1515 bp,左旁侧序列1460 bp,外源基因插入水稻基因组第7号染色体第1470725位.以左右旁侧序列为基础,建立了转基因水稻EB7001S的事件特异性定性PCR检测方法,采用该方法可从转基因水稻EB7001S中扩增到458和629 bp的2条特异性目的片段.该方法特异性强、稳定性好、灵敏度高,在模板中掺入EB7001S基因组DNA的量为0.1％时仍能通过普通PCR方法检测出来.以旁侧序列为基础,还建立了能快速、准确鉴定外源基因纯合株系的三引物PCR检测法.这些检测方法的建立,将为转基因水稻EB7001S的利用和检测提供关键技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖国樱	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	82	1161	20.0	29.0
2	邓力华	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	11	84	5.0	9.0
3	魏岁军	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	2	36	2.0	2.0