转基因大豆插入位点分析及特异性PCR检测方法的建立

• 作者: 于晓惠 吴辉 彭明 郭娜娜 陈银华 黄惜
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因大豆:LEC1基因 事件特异性检测 TAIL-PCR
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用及组织培养
• 页码范围: 1527-1531
• 分类号: S565.1
• 字数: 4364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2011.08.029

摘要

采用TAIL-PCR方法研究转基因大豆外源基因LEC1插入位点序列特征,并根据此特征建立了LEC1转化事件特异性检测方法.依据正义表达载体上T-DNA区段侧翼序列设计特异性引物和简并引物,获得4个同源序列.对获得的序列进行Blastn分析发现,p69、p148、p225均为载体T-DNA区段一部分,未见大豆基因组序列；P217插入片段的序列分析表明,该序列长863bp,其中T-DNA左边界序列长143 bp,720bp为大豆基因组片段,与大豆光系统Ⅱ类囊体膜蛋白(Thylakoid membrane proteins)的206-926区段同源性为99％,这表明,外源DNA插入了大豆基因组中类囊体膜蛋白编码区的206位.根据分离的序列建立事件特异性定性检测方法,扩增片段大小为277 bp.该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因大豆品种LEC1的身份识别提供了有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭明	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	136	1114	16.0	25.0
2	郭娜娜	海南大学农学院	1	4	1.0	1.0
3	吴辉	海南大学农学院	7	69	5.0	7.0
4	于晓惠	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	4	8	2.0	2.0
5	黄惜	海南大学农学院	17	50	4.0	6.0
6	陈银华	海南大学农学院	35	254	9.0	14.0