转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究

• 作者: 卢长明 吴刚 武玉花 聂淑晶 肖玲
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: GMO 事件特异性检测 定性PCR RF1转化事件 左边界旁侧序列
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 265-271
• 页数: 7页
• 分类号: S565.4|Q788
• 字数: 5753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-9084.2008.03.001

摘要

采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法.从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和463bp的旁侧基因组序列.根据已发表的RF1右边界旁侧序列的信息,发现外源T-DNA在向油菜基因组整合的过程中,在整合位点处有75bp的基因组序列丢失.根据分离的RF1左边界旁侧序列,建立了RF1事件特异性定性检测方法,扩增片断大小为284bp.利用建立起来的RF1事件特异性定性检测方法可以准确的将转基因油菜RF1与其它的转基因油菜品种区分开,检测灵敏度达到5个拷贝(0.013%).该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因油菜品种RF1的身份识别提供了有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴刚	中国农业科学院油料作物研究所	52	649	13.0	23.0
2	武玉花	中国农业科学院油料作物研究所	28	355	11.0	18.0
3	卢长明	中国农业科学院油料作物研究所	45	503	13.0	20.0
4	肖玲	中国农业科学院油料作物研究所	16	298	10.0	16.0
5	聂淑晶	中国农业科学院油料作物研究所	1	19	1.0	1.0