E.coli O157∶H7鞭毛蛋白H7抗原的表达纯化及抗血清的制备

• 作者: 周洁 徐悦玥 李素芹 李越希 潘英 蔡冉 许桂丽
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: E.coli O157∶H7 鞭毛蛋白H7抗原 原核载体 E.coli BL21 (DE3) Flic表达 抗血清制备
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 199-203
• 页数: 5页
• 分类号: Q811.4
• 语种: 中文

摘要

应用生物信息学分析工具对E.coli O157∶ H7鞭毛蛋白H7抗原(flic 基因)表位进行分析,筛选抗原表位较富集的片段;优化基因序列,使其适合在原核载体中表达并化学合成序列.构建重组质粒pGEX-4T-2-flic和pET28a(+)-flic,转化E.coli BL21 (DE3),IPTG诱导蛋白表达,分别用GST胶亲和层析技术和金属螯合层析技术纯化GST标签和His标签的目的蛋白,获得了高纯度的GST-Flic和His-Flic.使用His-Flic抗原免疫新西兰大耳白兔,间接ELISA法检测体液免疫效价,兔颈动脉取血并离心制备获得兔抗血清.纯化的两种蛋白和制备的兔血清多抗为研制E.coli O157∶H7检测试剂奠定了基础.