甘油激酶和3-磷酸甘油脱氢酶基因在大肠杆菌中的克隆表达

• 作者: 周长林 杨洋 王慧 窦洁 袁超 韩小容
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘油激酶 3-磷酸甘油脱氢酶 甘油 莽草酸 大肠杆菌 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 325-328
• 页数: 4页
• 分类号: Q55
• 语种: 中文

摘要

莽草酸是抗流感有效药物“达菲”的前体物质.作者等之前的研究中,发现甘油作为碳源时重组大肠杆菌生物合成莽草酸的量最高,说明甘油代谢途径对莽草酸的生物合成有重要的影响,甘油激酶和3-磷酸甘油脱氢酶是大肠杆菌甘油代谢途径的关键酶,对它们进行克隆表达来研究甘油代谢途径对大肠杆菌生物合成莽草酸的影响.文章采用PCR方法从大肠杆菌D H5α基因组中扩增得到长度均为1.5 kb的甘油激酶基因(glpK)和3-磷酸甘油脱氢酶基因(glpD),并构建了重组表达载体pET-3b-glpD-glpK,转化E.coli BL21(DE3)后得到重组的E.coli BL21(DE3)-pET3b-glpD-glpK,并采用SDS-PAGE检测目的基因蛋白的表达.结果表明,glpK和glpD基因已成功构建到pET-3b-glpD-glpK质粒中,SDS-PAGE也检测到了目的基因的成功表达(55 k);同时,重组E.coli BL21(DE3)-pET3b-glpD-glpK的甘油消耗比出发菌株提高了16％,莽草酸积累量是出发菌株的3.5倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周长林		80	451	12.0	18.0
2	窦洁		41	234	9.0	14.0
3	王慧		23	46	4.0	6.0
4	杨洋		9	52	3.0	7.0
5	袁超		1	0	0.0	0.0
6	韩小容		1	0	0.0	0.0