组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin对胶质瘤细胞的凋亡及Nanog和p53表达的影响

• 作者: 李仲颖 李冬雪 李静 杨洋 汪炎 牛朝诗 程传东 贺虎 鲍得俊
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Apicidin Nanog p53 神经胶质瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 246-251
• 页数: 6页
• 分类号: R730.264
• 字数: 5288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2014.03.006

摘要

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin对胶质瘤细胞系U87 Nanog和p53表达及细胞增殖、周期、凋亡的影响. 方法 体外常规培养U87细胞,MTT检测0.2、0.5、1.0、2.0μmol/Apicidin处理24、48、72 h后细胞抑制率的变化,同时设对照组,RT-PCR和Western blotting法检测1.0μmol/LApicidin处理48 h后细胞Nanog与p53 mRNA和蛋白水平的改变.DAPI染色检测1.0 μmol/LApicidin作用后细胞凋亡的改变;流式细胞仪检测0.2、0.5、1.0 μmol/LApicidin作用48 h后U87细胞凋亡率和细胞周期的变化. 结果 MTT显示不同浓度Apicidin处理后细胞生长出现抑制,并呈剂量、时间依赖性,48 h细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)为(1.74±0.13)μmol/L;RT-PCR检测发现1.0μmol/LApicidin组细胞Nanog mRNA表达较对照组降低,p53 mRNA表达增高.Western blotting检测显示与对照组比较,Nanog蛋白水平降低,而p53蛋白水平增高,差异有统计学意义(P＜0.05).DAPI染色发现1.0μmol/LApicidin组细胞核出现凋亡表现;流式细胞仪检测发现,0.5、1.0μmol/LApicidin作用48 h后U87细胞凋亡率为11.57％、19.67％,高于对照组(2.2％).S期细胞比例分别为(42.92±0.56)％、(56.95±0.53)％,高于对照组的(32.68±0.49)％,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Apicidin可以显著抑制U87胶质瘤细胞系生长,诱导细胞周期阻滞和凋亡产生,其机制可能与抑制干细胞标志性基因Nanog的表达和抑癌基因p53的转录及蛋白表达增加有关.