siRNA特异性抑制卵巢癌细胞葡萄糖调节蛋白78表达及其意义的研究

• 作者: 刘倩 原丹丹 吕楠 庄如锦 张丽颖 徐爱丽 李佩玲
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰(RNAi) Grp78 基因治疗 卵巢癌细胞
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 分子、生化遗传学与PCR技术
• 页码范围: 14-17,23
• 页数: 5页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文

摘要

目的 研究利用小分子干扰技术(RNAi),构建Grp78靶向RNA干扰质粒载体,观察其对人类卵巢癌细胞SK0V3Grp78基因表达的抑制作用.初步探讨RNA干扰技术抑制Grp78的表达作为卵巢癌基因治疗的可行性.方法 从GeneBank中选取人类卵巢癌细胞Grp78基因序列,采用siRNA Target Designer-Version 1.51设计软件设计Grp78基因发卡寡核苷酸,序列符合siRNA表达载体psiSTRIKETMU6的要求并与psiSTRIKETM质粒载体连接,采用脂质体转染法将含有特异性小分子干扰Grp78 mRNA的重组载体psiSTRIKETM/Grp78导入卵巢癌细胞系SK0V3中,分别在转染前、转染后24h、48h和72h通过RT-PCR和Western blot检测Grp78 mRNA及蛋白水平的表达情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡.四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞经梯度浓度紫杉醇处理后的细胞存活率.结果 成功构建RNA干扰质粒载体,靶向Grp78 RNA干扰质粒载体命名为psiSTRIKETM/Grp78.将上述质粒转染到卵巢癌细胞后,观察到psiSTRIKETM/Grp78能够有效的抑制Grp78 mRNA及蛋白表达.转染psiSTRIKETM/Grp78基因后的卵巢癌细胞增殖受到抑制,出现凋亡征象,且对化疗药物的敏感性增加.结论 构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKETM/Grp78能明显抑制Grp78 mRNA及蛋白的表达,增加卵巢癌细胞的化疗敏感性.RNAi技术抑制Grp78表达为卵巢癌的基因治疗开辟了新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李佩玲		104	420	10.0	15.0
2	徐爱丽		14	100	6.0	9.0
3	刘倩		34	115	7.0	8.0
4	张丽颖		17	81	6.0	8.0
5	庄如锦		13	107	5.0	10.0
6	原丹丹		7	18	3.0	4.0
7	吕楠		9	10	2.0	2.0