血浆EGFR19外显子缺失突变高灵敏度检测技术的建立

• 作者: 刘宝瑞 尹震宇 禹立霞 谢丽 钱晓萍 魏嘉
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EGFR 19外显子缺失突变 突变检测 血浆
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 407-410
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2
• 字数: 2564字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨结合酶切及片段分析技术建立稳定的高灵敏度EGFR19外显子缺失突变检测技术检测血浆EG-FR19外显子缺失突变的价值。方法设计针对野生型片段的限制性内切酶予以降低野生型DNA背景。通过野生型和突变型序列的分析，以野生型序列为酶切底物，选择工具内切酶Tru1Ⅰ，设计内外两个PCR反应引物，且内侧引物一端予以标记绿色荧光。采用PCR-酶切-PCR-片段分析步骤，优化各反应条件，得到稳定的技术。以野生型DNA稀释突变型DNA检测该方法的灵敏度。采用上述方法检测42例肺癌患者外周血浆中EGFR19外显子突变情况。结果采用野生型DNA稀释突变型DNA模拟检测本方法的灵敏度，能够检测出1∶1000（ Mt∶Wt）突变型DNA。42例肺癌患者中5例血浆EGFR19外显子存在缺失，其中4例为15bp的缺失，1例为24bp的缺失。结论本研究建立了一种联合酶切与片段分析的高灵敏度血浆EGFR 19外显子缺失突变检测技术，能够有效从外周血中检测出EGFR19外显子缺失突变。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹震宇	210008 南京 南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心	2	8	2.0	2.0