一步法多重荧光定量RT-PCR检测人杯状病毒的建立及应用

• 作者: 崔大伟 王原 胡正军 陈功祥
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人杯状病毒 札如病毒 诺如病毒 一步法多重荧光定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 647-651
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.09.02

摘要

目的 建立检测人杯状病毒(human calieivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-G Ⅰ和NoV-GⅡ)的一步法多重荧光定量RT-PCR (rRT-PCR)法.方法 用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,通过合成的对应病毒基因的质粒来评价该方法的灵敏度、特异性和重复性,检测临床标本并对阳性结果进行基因测序验证.结果 建立的rRT-PCR法检测SV、NoV-G Ⅰ和NoV-GⅡ的灵敏度均达到103 copies/mL,特异性为100％,且变异系数(CV)均≤1.275％.HuCVs检出率为21.43％(75/350),其中SV、NoV-G Ⅰ和NoV-GⅡ分别为14.67％(11/75)、21.33％ (16/75)和64.00％(48/75).随机选择检测阳性结果进行测序,结果均与该法检测结果一致.结论 建立的rRT-PCR法可同时检测并区分SV、NoV-G Ⅰ和NoV-GⅡ病毒,可用于HuCVs引起的急性腹泻散发和暴发疫情的监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈功祥	浙江大学医学院	40	375	12.0	17.0
5	崔大伟	浙江大学医学院附属第一医院检验科	40	163	7.0	10.0
6	王原	浙江大学医学院	22	107	6.0	9.0
8	胡正军	浙江中医药大学附属第一医院检验科	11	32	3.0	5.0