去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位表达及用于自身免疫性肝炎诊断的研究

• 作者: 乔健 姜东林 李成万 薛育政 龚芳
• 来源期刊: 现代免疫学
• 关键词: AIH 重组抗原 原核表达 酶联免疫吸附试验 免疫诊断
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 403-407
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)是肝细胞膜表面特有的一种内吞性受体,H1是参与内吞功能的主要亚基.自身免疫性肝炎(autoimmune-hepatitis,AIH)患者存在抗-ASGPR的自身抗体.本研究以去唾液酸糖蛋白受体H1亚基在大肠杆菌中诱导表达,用纯化的重组去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位rH1作为检测抗原,建立间接法rH1-IgG-ELISA,检测抗去唾液酸糖蛋白受体IgG抗体,观察其阳性和阴性符合率,并对rH1-IgG-ELISA检测的精确度、灵敏度和特异性进行评价.结果显示制备的rH1重组蛋白纯度在90％以上;以该重组抗原建立的rH1-IgG-ELISA的最佳检测条件为:重组抗原rH1的包被浓度为6 μg/ml,血清稀释度1 ∶ 100,酶标记的羊抗人IgG 1∶3000稀释;用rH1-IgG-ELISA对混合ASGPR阳性和阴性血清的重复检测表明:IgG阳性血清的检测值的变异系数(CV值)为9.9％,IgG阴性血清的CV值为9.7％;灵敏度检测表明血清稀释度在1∶50～1∶200均可检出阳性;特异性试验的抑制率为63.5％; rH1-IgG-ELISA与总符合率为87.36％,其中阳性和阴性符合率分别为82％(41/50)和93.33％(42/45).故建立的rH1-IgG-ELISA具有较好的灵敏性和特异性,与提供的ASGPR阳性血清有较高的符合率,表明该法具有较好的AIH诊断价值,可进一步推广应用.