沉默HepG2细胞核糖核酸酶抑制因子的shRNA逆转录病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 丁宁 李坤 李琳 王福强
• 来源期刊: 中国医药导报
• 学科: 医学
• 关键词: 人核糖核酸酶抑制因子 shRNA 逆转录病毒载体 构建
• 年，卷（期）: 2014,（14）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16,27
• 页数: 4页
• 分类号: R394.33
• 字数: 2529字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建针对人核糖核酸酶抑制因子(hRI)的shRNA逆转录病毒载体,为探讨hRI抗肿瘤作用机制打下基础.方法 用亚克隆法将目的片段pkd-dsRI和pkd从表达载体pKD-dsRI克隆到pLNCX上,用双酶切筛选得到阳性克隆后,用脂质体法将其转染到人肝癌细胞HepG2细胞中,用800 mg/L G418筛选2周,产生稳定的细胞克隆后,用RT-PCR检测细胞中核糖核酸酶抑制因子mRNA表达的变化.结果 双酶切鉴定为阳性克隆.RT-PCR表明,对比空白组(0.790±0.014)和空载体组(0.904±0.027),干扰组hri基因表达(0.361 ±0.048)明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 成功构建了针对hRI的shRNA逆转录病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李坤	大连大学医学院	48	216	7.0	13.0
2	李琳	大连市妇幼保健院检验科	14	110	6.0	10.0
3	王福强		17	30	3.0	5.0
4	丁宁	大连大学医学院	36	57	5.0	6.0