昆虫杆状病毒系统表达登革2型病毒prM/E蛋白

• 作者: 刘晓宇 姚立红 张智清 郭建强 陈爱珺 陈辉
• 来源期刊: 中国医学装备
• 学科: 医学
• 关键词: 登革2型病毒 prM蛋白 E蛋白 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 学术论著
• 页码范围: 52-54,55
• 页数: 4页
• 分类号: R512.8
• 字数: 2526字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1672-8270.2014.05.019

摘要

目的：构建表达登革2型病毒prM/E蛋白的真核细胞系。方法：应用聚合酶链反应(PCR)方法从含有登革2型病毒prM/E基因的质粒中扩增得到prM/E基因。将该片段亚克隆到pGEM-T Easy载体上，用XhoⅠ和NheⅠ双酶切将其与同样双酶切的pFastBac Dual质粒连接，构建转移载体pFBD-prM/E。将转移载体转化的同时，含有杆状病毒穿梭载体Bacmid和Helper质粒的感受态DH10 Bac得到重组Bacmid；用后者转染Sf 9细胞获得重组杆状病毒。双酶切鉴定构建的重组杆状病毒转移载体pFBD-prM/E，间接免疫荧光法检测目的蛋白的表达。结果：通过间接免疫荧光法可观察到特异性绿色荧光，即检测到prM/E蛋白的表达。结论：利用昆虫杆状病毒系统成功表达了登革2型病毒prM/E蛋白，为登革病毒prM和E蛋白的功能研究、登革病毒感染的诊断以及登革病毒样颗粒疫苗的研制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈辉	首都医科大学基础医学院病原生物学系	54	241	9.0	13.0
2	姚立红	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	18	46	3.0	6.0
3	张智清	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	33	116	7.0	9.0
4	陈爱珺	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	13	8	2.0	2.0
5	刘晓宇		21	37	4.0	5.0
6	郭建强	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	13	13	2.0	3.0