利用自裂解多肽T2A在牛耳皮肤成纤维细胞中实现多基因共同表达

• 作者: 张俨 马晴雯
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 多顺反子载体 自裂解多肽T2A 牛耳皮肤成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 361-364
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.03.013

摘要

目的:探讨利用自裂解多肽2A构建的多顺反子载体能否在牛耳皮肤成纤维细胞中实现多基因的有效表达.方法:利用来自一点褐翅蛾病毒(TaV)的2A元件(T2A)将GFP和Neo基因连接到同一载体中,构建pCMV-GFP-T2A-Neo质粒,将其转染牛耳皮肤成纤维细胞,以FACS检测GFP基因的表达,RT-qPCR检测GFP、T2A和Neo的表达.结果:由T2A连接的GFP和Neo基因在mRNA水平上都有显著表达,且表达水平相当.结论:以T2A连接的基因在转入细胞后能正常翻译和表达,显示T2A在牛耳皮肤成纤维细胞中具有自裂解功能,可作为一种构建多顺反子载体的有效工具用于牛耳皮肤成纤维细胞的基因转移,为其将来在转基因牛研制中的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马晴雯		4	2	1.0	1.0
5	张俨		1	1	1.0	1.0