转基因棉花GHB119品系特异性定量PCR检测方法的建立

• 作者: 刘月明 宋青 李想 杨捷琳 汪秀秀 潘良文
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 实时荧光定量PCR 转基因棉花GHB119 品系特异性
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 380-388
• 页数: 9页
• 字数: 6679字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.03.014

摘要

为了保障和促进我国口岸进口转基因产品安全相关法律法规的顺利实施,针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的棉花品系GHB119,本研究利用TaqMan实时荧光PCR (Real-time PCR)技术,根据转基因棉花(Gossypium sp.) GHB 119 3'端外源插入片段与棉花基因组DNA之间的邻接区序列设计引物和探针,并对引物、探针以及扩增体系进行了筛选和优化,建立了转基因棉花GHB119品系特异性实时荧光定量PCR检测方法.结果表明,建立的检测方法特异于转基因棉花GHB119成分检测,检测下限(limit of detection,LOD)为10拷贝的基因组DNA,定量下限(limit of quantification,LOQ)为25拷贝GHB119基因组DNA,对盲样的定量结果显示,测定值与设定值间的偏差(bias)、标准偏差(standarddeviation,SD)、相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)等均在可接受范围内.本研究建立的GHB119品系特异性实时荧光定量PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确地对混合样品中转基因棉花GHB119成分进行定量检测分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李想		18	126	7.0	10.0
2	杨捷琳		33	146	7.0	10.0
3	潘良文	华东理工大学生物工程学院	48	495	13.0	20.0
5	宋青		22	107	7.0	9.0
6	刘月明		13	73	5.0	8.0
7	汪秀秀	华东理工大学生物工程学院	2	22	1.0	2.0