六种常见细菌16S rDNA基因的PCR-RFLP指纹图谱检测方法的建立

• 作者: 吴达 张银霞 李儒 毛海岩 王军平 肖西志 龙玲
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 16S rDNA PCR-RFLP 指纹图谱
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 页码范围: 521-526
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

为建立针对肺炎克雷伯氏菌、产色葡萄球菌、莫拉菌、睾丸酮丛毛单胞菌、炭疽芽胞杆菌和布氏杆菌的快速检测鉴定方法,提取上述6种菌的基因组DNA,然后以提取的DNA为模板,用16S rDNA的通用引物27f和1492r进行PCR扩增.用17种内切酶,即Ava工、BgⅡ、BamH工、Dra Ⅰ、EcoR工、EcoRⅡ、HindⅢ、Hinf、Hpa工、Pst工、Sma工、Taq Ⅰ、Xba工、XmaⅠ、Alu工、Xho工和PvuⅠ,分别对6种菌的16SrDNA基因的扩增产物进行酶切.酶切产物经琼脂糖凝胶电泳分析.结果显示,每种菌形成了特异的16SrDNA RFLP指纹图谱.结果表明,建立的方法能够对6种细菌进行准确的鉴定,适用于口岸动物皮毛中6种细菌的快速鉴定.