大豆再生抑制消减杂交文库的构建

• 作者: 刘明 孙晶 张彬彬 李冬梅 李文滨 李静 武小霞 苏安玉
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 抑制消减杂交(SSH) cDNA文库 再生
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 38-44
• 页数: 7页
• 分类号: S565.1
• 字数: 5178字
• 语种: 中文

摘要

大豆再生受基因型限制，高效稳定再生体系建立难、遗传转化效率低，影响生物技术的应用。为获得与大豆再生相关基因，解析大豆再生基因分子机制，从而建立高效、稳定再生体系，为生物技术在大豆分子育种中的应用奠定基础。文章利用抑制性消减杂交技术（Suppression subtractive hybridization，SSH），以东农50子叶节为材料构建消减杂交cDNA文库，从文库中随机挑取917个阳性克隆，PCR鉴定插入片段大部分集中在100~750 bp，利用BLAST在GenBank数据库进行序列相似性比对，经过同源性比对归并后得到411个高质量ESTs片段，功能分析表明，这些基因与信号转导、葡萄糖、蛋白质大分子生物合成代谢，光、叶形态发生相关；调控细胞凋亡、细胞自身防御、细胞壁分化；参与各种激素及细胞分裂素介导的信号通路。