不同基因型 HBV 真核表达载体的构建和表达

• 作者: 叶盛前 张玉华 王天真 赵然 韩昌松
• 来源期刊: 哈尔滨医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 HBV 基因型 载体
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 263-267
• 页数: 5页
• 分类号: R373.21
• 字数: 3625字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建A、B、C和D四种基因型HBV克隆载体，分析和比较它们在HepG2和Huh7细胞中的表达和复制。方法利用分子生物学技术将连接在pUC19上的A、B、C和D四种基因型HBV全序列连接到改建的pIRES2-EGFP真核表达载体中；脂质体转染法将构建的重组载体瞬时转染入HepG2和Huh7细胞中；利用载体所携带的绿色荧光蛋白在显微镜下观察转染效率，并利用ELISA和荧光定量PCR技术检测细胞培养上清中HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表达水平。结果经鉴定，重组HBV真核表达载体构建成功，在HepG2和Huh7细胞中转染效率在50％～60％之间，四种基因型HBV在宿主细胞中均有稳定的复制和表达，但不同基因型在表达水平上存在差异。结论成功构建A、B、C和D四种基因型HBV真核表达载体，各基因型在HepG2和Huh7肝癌细胞系中均表现出较高的转染效率，为后续HBV及其基因型研究提供了实验载体。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王天真	哈尔滨医科大学病理学教研室	17	40	3.0	6.0
2	赵然	哈尔滨医科大学病理学教研室	9	50	4.0	7.0
3	张玉华	哈尔滨医科大学病理学教研室	8	59	4.0	7.0
4	叶盛前	哈尔滨医科大学病理学教研室	5	17	2.0	4.0
5	韩昌松	哈尔滨医科大学病理学教研室	5	12	3.0	3.0