p300基因小干扰RNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌ZR75-1细胞的影响

• 作者: 丁丽华 刘婕 卫勃 叶棋浓 张亚楠 朱杰 陈志达
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: p300基因 小干扰RNA 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 621-624
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 4107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.05.004

摘要

目的:构建p300基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体,检测其对p300蛋白表达的干扰,以及对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响.方法:利用RNA干扰(RNAi)技术设计并合成针对p300基因的siRNA,并将其克隆到siRNA表达载体pSIH-H1上,经酶切和测序验证,用293T人胚肾细胞包装p300 siRNA慢病毒,感染乳腺癌细胞ZR75-1,建立敲低p300表达的稳定细胞株,通过实时定量PCR和Western印迹检验RNAi的干扰效果,利用细胞生长实验检测p300 siRNA对ZR75-1细胞生长的影响.结果:酶切和测序证明构建了p300 siRNA真核表达载体;实时定量PCR和Western印迹证明构建的siRNA能有效抑制p300基因的表达,并建立了敲低p300表达的稳定细胞株;细胞生长实验证实p300 siRNA可有效促进ZR75-1细胞的生长.结论:构建了p300基因的siRNA真核表达载体,转染细胞后能有效抑制p300基因的表达,且能促进ZR75-1细胞的生长,表明构建的p300 siRNA具有功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
2	卫勃	解放军总医院普通外科	76	545	13.0	19.0
3	丁丽华	军事医学科学院生物工程研究所	47	135	6.0	8.0
4	刘婕	军事医学科学院生物工程研究所	11	10	2.0	2.0
5	张亚楠	军事医学科学院生物工程研究所	9	8	2.0	2.0
6	陈志达	解放军总医院普通外科	12	31	3.0	5.0
7	朱杰	军事医学科学院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0