添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法

• 作者: 刘坤 张亚军 张笛 曾庆梅 杨晋 王琳
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 沙门氏菌 PCR检测 扩增内标 假阴性
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 页码范围: 54-59
• 页数: 6页
• 字数: 4564字
• 语种: 中文

摘要

通过构建人工扩增内标，建立可以有效指示沙门氏菌检测过程可能出现假阴性情况的PCR检测方法。本研究基于沙门氏菌invA基因设计特异性引物，复合法构建扩增内标，建立PCR检测体系。特异性引物LW，对33株沙门氏菌和6株非沙门氏菌标准株进行检测，结果显示，所有沙门氏菌均扩增出385 bp的目标片段，非沙门氏菌则只能扩增出484 bp的扩增内标片段，特异性良好。灵敏度实验表明，该检测体系的灵敏度可达6.35 fg/μL。人工污染实验表明，起始染菌量为3.2 CFU/25 mL时，仅需8 h增菌培养便可检出。大量食品样品检测证明，该检测体系确实可以有效的避免PCR检测过程出现的假阴性，提高检测准确性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾庆梅	合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心	45	800	14.0	27.0
2	王琳	合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心	23	82	5.0	8.0
3	刘坤	合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心	18	55	4.0	7.0
4	张亚军	合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心	2	4	1.0	2.0
5	杨晋	合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心	3	4	1.0	2.0
6	张笛	合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心	3	23	3.0	3.0