添加扩增内标的PCR方法快速检测食品中的沙门氏菌

• 作者: 付绪磊 张义全 张德福 李春 杨文慧 殷喆 汤轶伟 白凤翎 赵丽红
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 沙门氏菌 PCR检测 扩增内标对照 假阴性
• 年，卷（期）: 2015,（24）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 54-57,63
• 分类号: TS201.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.24.002

摘要

为了建立一种含扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,以细菌16S rRNA为扩增内标对照,以沙门氏菌invA基因为靶基因设计了一对引物,并优化了PCR反应体系.通过对20种细菌进行PCR检测显示,该方法对沙门氏菌具有良好的特异性.灵敏度实验表明,该检测方法对沙门氏菌纯DNA模板的检测灵敏度为61.1 fg/μL,对沙门氏菌纯培养物的检测灵敏度为2×102 cfu/mL.对人工污染蛋清的检测实验显示,沙门氏菌接种量为2 cfu/25 mL的鸡蛋清样品经过8h增菌培养后,可被该方法检出.结果表明,该检测方法特异性强、灵敏度高,能排除沙门氏菌PCR检测方法中可能出现的假阴性现象,适用于鸡蛋等食品中沙门氏菌的快速检测.