中国美利奴绵羊磷脂酶Czeta基因表达载体的构建及原核表达

• 作者: 乌热力哈孜 刘强 木尔扎提·阿勒腾别克 王银龙 贺志锐 赛务加甫
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 磷脂酶C zeta蛋白 原核表达 Western blot
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 104-109
• 页数: 6页
• 分类号: Q789|S852.2
• 字数: 4995字
• 语种: 中文

摘要

构建美利奴绵羊磷脂酶 C zeta（PLCζ）融合蛋白表达载体，并在原核细胞内表达及纯化，为其特异性抗体的制备及生物学功能研究奠定基础。用 PCR 技术扩增出 PLCζ基因片段，亚克隆到原核表达载体pCzn1中，导入 Arctic Express TM （DE3）感受态细胞，IPTG 诱导表达，收样后进行 SDS-PAGE 电泳或Western blot 检验 PLCζ的表达情况。用镍离子亲和层析的方法大量纯化融合蛋白。结果显示，重组质粒经 PCR、酶切和测序鉴定证明载体构建正确。pCzn1表达载体在 Arctic Express TM （DE3）表达菌中能很好地表达融合蛋白。表达纯化后可获得了分子量约74 ku 的融合蛋白，符合预期大小。成功构建 pCzn1-PLCζ原核表达载体，表达并纯化了其融合蛋白，Western blot 试验表明其蛋白分子的完整性良好，这将有利于对 PLCζ蛋白进行深入的研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘强	石河子大学动物科技学院	27	49	5.0	5.0
2	赛务加甫	石河子大学动物科技学院	39	52	3.0	5.0
3	王银龙	石河子大学动物科技学院	15	32	3.0	5.0
4	贺志锐	石河子大学动物科技学院	7	20	3.0	3.0
5	木尔扎提·阿勒腾别克	石河子大学动物科技学院	6	5	2.0	2.0
6	乌热力哈孜	石河子大学动物科技学院	2	7	2.0	2.0