鼠疫耶尔森菌Ⅲ型分泌系统效应子YopT基因克隆及功能的初步研究

• 作者: 何湘 刘京梅 曹叶 苏文莉 钟辉 马胜利 魏从文
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 耶尔森菌,鼠疫 Ⅲ型分泌系统 YopT 先天性免疫
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 463-465,470
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2|Q785
• 字数: 3035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.06.014

摘要

目的 构建鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)Ⅲ型分泌系统效应子YopT真核表达载体,并初步探讨其对宿主天然免疫的影响.方法 提取y.pestis 91001株基因组DNA,并以此为模板,PCR扩增yopT基因,酶切并连接入pCMV-HA载体,转化后挑选阳性克隆送测序.测序正确的克隆进行质粒扩增后,转染HEK293T细胞,免疫印迹检测其表达.通过荧光素酶报告基因分析的方法检测YopT对IFN-β及NF-κB基因的影响.结果 成功克隆了yopT基因,并在真核细胞中得到表达;yopT抑制IFN-β及NF-κB报道基因活性.结论 初步研究表明,yopT抑制IFN-β和NF-κB基因表达,为进一步研究yopT的功能打下了基础.