多种探针的RT-PCR检测H5N1病原体方法的建立及应用

• 作者: 娄国平 张昭勇 李显东
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 探针引物 逆转录聚合酶链式反应 H5N1 病原体 引物浓度
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 73-76
• 页数: 4页
• 分类号: R373.13|Q503
• 字数: 2706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2014.05.017

摘要

目的：建立与应用多种探针的 RT-PCR分析 H5N1病原体的检测方法体系。方法通过 GenBank发表的基因序列分析，针对保守区分别设计并合成2对特异性引物（P1/P2，P3/P4）。通过对扩增条件的优化，建立了检测两种病毒的快速双重PCR方法。结果合适引物浓度：P1/P2为0.32μmol/L，P3/P4为0.96μmol/L。双重检测的最小病毒核酸量为2 ng/μl，H5N1病原体混合液在相对应位置出现特异性条带，而其他病毒及空白对照均未出现条带。结论多种探针的RT-PCR分析对于 H5N1病原体检测方法在合理引物浓度的应用下具有很好的敏感度与特异度，值得在检验中推广应用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张昭勇	湖北医药学院附属太和医院检验部	34	201	8.0	11.0
2	娄国平	湖北医药学院附属太和医院检验部	10	80	4.0	8.0
3	李显东	湖北医药学院附属太和医院检验部	12	61	5.0	7.0