UCA1a（CUDR）基因真核表达载体的构建及其在膀胱癌UM-UC-2细胞中的表达

• 作者: 史迎莉 张晓芹 张红 李旭 王宇 陈葳
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: UCA1a(CUDR)基因 真核表达载体 转染 UM-UC-2 细胞系
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 504-507
• 页数: 4页
• 分类号: R737.14
• 字数: 3649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140308

摘要

目的：构建 UCA1 a（CUDR）基因真核表达载体 pcDNA-UCA1 a（CUDR），观察其在膀胱癌 UM-UC-2细胞中的表达，为研究 UCA1 a（CUDR）基因与膀胱癌的关系提供实验依据。方法：以膀胱癌 BLZ-211细胞的5′-RACE-Ready cDNA 为模板，采用 PCR 法克隆 UCA1 a（CUDR）全基因，经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后与真核表达载体 pcDNA3.1（＋）连接，构建 pcDNA-UCA1a（CUDR）重组质粒。双酶切及测序鉴定后，稳定转染至体外培养的人膀胱癌 UM-UC-2细胞系，利用 RT-PCR法检测转染 pcDNA-UCA1 a（CUDR）的 UM-UC-2细胞和转染空质粒 pcDNA3.1（＋）的 UM-UC-2细胞中 UCA1a（CUDR）基因的表达。结果：克隆的目的基因片段约为2200 bp，与预期结果相符，表明成功扩增 UCA1a（CUDR）基因；经双酶切及测序鉴定，成功构建真核表达载体 pcDNA-UCA1 a（CUDR）。半定量 RT-PCR 法检测，与转染空质粒的细胞比较，转染表达载体 pcDNA-UCA1 a （CUDR）的UM-UC-2细胞中 UCA1 a（CUDR）基因表达量升高。结论：成功构建pcDNA-UCA1 a（CUDR）真核表达载体，且 UCA1 a（CUDR）基因在转染表达载体的 UM-UC-2细胞中高表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭	西安交通大学医学院第一附属医院转化医学中心	136	613	11.0	16.0
2	陈葳	西安交通大学医学院第一附属医院转化医学中心	135	538	11.0	15.0
3	张晓芹	陕西中医学院医学科研实验中心	41	158	8.0	10.0
4	张红	陕西中医学院医学科研实验中心	80	326	10.0	14.0
5	王宇	陕西中医学院医学科研实验中心	32	68	3.0	7.0
6	史迎莉	陕西中医学院医学科研实验中心	19	85	6.0	8.0