虾过敏原Pen a1抗原表位的关键氨基酸分析

• 作者: 支玉香 李树锦 李淑荣 潘家荣 牟慧 王志东 赵杰 赵鑫 高美须
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: Pena1 抗原表位 突变多肽 关键氨基酸
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 研 究 报 告
• 页码范围: 1604-1610
• 页数: 7页
• 字数: 4392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.140229

摘要

建立了一种利用表位抗体筛选虾过敏原Pen a1抗原表位中关键氨基酸的方法。利用生物信息学软件MEGA5计算Pen a1中表位的氨基酸组成和出现频率,并采用DNAMAN软件对SDAP数据库中致敏食物原肌球蛋白的氨基酸保守性分析,综合两种方法筛选出各表位可能的关键氨基酸,Epitope 1：K, E, N；Epitope 2：K, L, E；Epitope 3：E, R, D, L, Q；Epitope 5：K, L, Q。用丙氨酸取代并合成突变多肽。利用表位抗体,通过竞争性免疫斑点法及间接ELISA方法检测突变多肽的抗体结合能力,筛选出各表位的关键氨基酸。分别为：Epitope1：谷氨酰胺；Epitope2：亮氨酸和谷氨酸；Epitope3：亮氨酸和天冬氨酸；Epitope5：亮氨酸。实验结果证明了此种筛选关键氨基酸的方法的可行性,为Pen a1致敏机理的研究及利用基因修饰脱敏提供了一定的理论依据。