来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达

• 作者: 于梁 任媛媛 侯欣彤 李剑光 林瑞东 滕利荣 董媛 高朝辉
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: D-氨基酰化酶 产碱杆菌 基因合成 融合表达
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 页码范围: 1670-1674
• 页数: 5页
• 分类号: O629.74|Q786
• 字数: 3879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20140074

摘要

将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan,转化进E. coil BL21(DE3)中进行融合表达.经SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和活性测定发现, D-ANase可在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白可达到菌体总蛋白的69.2%,密码子优化后基因构建的工程菌发酵活性为96 U/mL,重组蛋白经超声细胞破碎及Ni2+柱亲和层析纯化,比活可达1692.3 U/mg,纯度可达95%以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯欣彤	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	3	113	2.0	3.0
2	高朝辉	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	11	83	5.0	9.0
11	董媛	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	19	91	5.0	9.0
12	任媛媛	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	4	25	2.0	4.0
13	林瑞东	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
14	于梁	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
15	李剑光	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0