实时定量聚合酶链反应结合Taqman荧光探针JCV-P检测肾移植受者JC病毒

• 作者: 周文强 王强 石炳毅 肖漓 蔡明 许亮 许晓光 韩永 黄海燕
• 来源期刊: 山西医药杂志
• 关键词: 聚合酶链反应 肾移植 JC病毒
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 243-246
• 页数: 4页
• 字数: 3606字
• 语种: 中文

摘要

目的：建立肾移植受者尿液和外周血JC病毒（JCV）感染实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测方法。方法针对JCV基因组设计特异性引物JCV-F和JCV-R ，Taqman荧光探针JCV-P ，探针的5′端标记有荧光基团，在除5′端外的任意一个位置上标记有淬灭基团；然后处理待测样本，进行PCR反应，建立重组质粒标准曲线，评价特异性、灵敏度、重复性。结果将检测阳性的扩增产物进行基因测序，测序结果经BLAST 比对后证实JC V基因序列；利用上述方法对86份样本进行检测：20份JC V血清样本及20份JC V尿液样本检测均为阳性，有S型扩增曲线，动态范围测定显示103～1010拷贝/m L标准曲线具有良好的相关性；20份健康人尿液样本和20份血液样本及6份临床常见的其他病原体血液样本检测均为阴性，无S型扩增曲线。结论实时荧光定量PCR结合Taqman荧光探针JCV-P检测肾移植术后患者JCV方法可用于肾移植术后JCV感染的的早期诊断，对预防JCV感染造成的多瘤病毒相关性肾病（PVAN）和进行性多灶性脑白质病（PML）具有一定意义。