人 Cyclin D1基因克隆与原核表达

• 作者: 白瑞霞 谭艳 贾海琴 韩晓芳
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: 肝肿瘤/遗传学 细胞周期蛋白D1 克隆,分子 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 224-226
• 页数: 3页
• 字数: 2256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2014.02.023

摘要

目的：从人肝癌组织中克隆人的Cyclin D1基因，并原核表达Cyclin D1蛋白。方法从人肝癌组织中提取RNA，逆转录PCR扩增Cyclin D1 cDNA，PCR产物进行TA克隆和DNA序列分析；阳性TA克隆Cyclin D1片段亚克隆入大肠杆菌BL21的表达载体PET32a＋，异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside，IPTG）诱导表达人Cyc-lin D1。结果逆转录PCR扩增出约483 bp的DNA片段，TA克隆和DNA序列分析显示重组片段是人Cyclin D1基因序列， Cyclin D1 cDNA亚克隆入大肠杆菌中BL21载体NotI和EcoRI位点之间；异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（ Isopropyl β-D-1-thio-galactopyranoside ，IPTG）诱导出约36 KD的蛋白。结论从人肝癌组织中成功地扩增出人Cyclin D1基因，并且在大肠杆菌中BL21得到表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白瑞霞	内蒙古自治区人民医院检验科	22	33	3.0	4.0
2	谭艳	内蒙古自治区人民医院检验科	32	87	5.0	8.0
3	韩晓芳	内蒙古自治区人民医院检验科	35	112	6.0	9.0
4	贾海琴	内蒙古自治区人民医院检验科	35	122	6.0	10.0