SIGIRR胞内区酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活作用检测

• 作者: 冯华松 吴学玲 段蕴铀 钱桂生 陈旭昕
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白 双杂交系统技术 诱饵质粒 自激活
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1164-1167
• 页数: 4页
• 字数: 4213字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.10.004

摘要

目的：构建单免疫球蛋白白细胞介素-1受体相关蛋白（SIGIRR）胞内区酵母双杂交诱饵质粒，并检测其是否存在自激活作用。方法聚合酶链反应（PCR）扩增人SIGIRR胞内区基因片段（480～1230 bp），并将此基因片段重组入pSos载体中，构建诱饵质粒pSos-SIGIRR ，经酶切及测序鉴定构建正确后，将重组质粒与对照质粒共转化感受态酵母菌cdc25H ，接种于25℃SD/Glucose（-UL）和SD/Galactose（-UL）平板以及37℃ SD/Glucose（-UL）和SD/Galactose（-UL）平板上，连续观察6 d酵母菌生长状况；用Western blot法检测目的蛋白表达情况。结果正确构建了人SIGIRR胞内区酵母双杂交诱饵质粒pSos-SIGIRR ， pSos-SIGIRR在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。Western blot结果显示，目的蛋白以170×103的融合蛋白形式表达。结论诱饵质粒pSos-SIGIRR可应用于酵母双杂交系统中，为在人肺互补脱氧核糖核酸（cDNA ）文库中寻找与SIGIRR相互作用蛋白奠定了重要基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱桂生	第三军医大学新桥医院呼吸内科	591	5662	33.0	52.0
2	段蕴铀	中国人民解放军海军总医院呼吸内科	25	127	6.0	10.0
3	吴学玲	第三军医大学新桥医院呼吸内科	42	302	8.0	14.0
4	陈旭昕	中国人民解放军海军总医院呼吸内科	20	41	4.0	5.0
5	冯华松	中国人民解放军海军总医院呼吸内科	19	58	4.0	6.0