酵母双杂交系统中LRP16诱饵质粒的构建

• 作者: 伍志强 杨契 赵亚力 韩为东
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: LRP16基因 质粒 酵母 双杂交技术
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-19
• 页数: 3页
• 分类号: R373
• 字数: 2844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2008.01.007

摘要

目的:在酵母细胞中构建LRP16诱饵质粒,以期从人cDNA文库中钓取可与LRP16相互作用的蛋白.方法:pLPC-LRP16质粒经酶切、琼脂糖凝胶电泳、回收,获得LRP16的基因片段,将其连接至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中,经酶切验证其正确插入方向后,将重组诱饵质粒转化酵母菌AH109和Y187,并检测其在酵母中有无自激活作用和毒性.随后提取转化后的酵母总蛋白,经Western blot检测诱饵质粒在酵母中的表达情况.以鉴定其作为诱饵蛋白的可行性.结果:重组诱饵质粒经酶切验证,片段大小和插入方向均正确,将其转化入酵母菌后无自激活作用和毒性,Western blot证实在酵母中重组诱饵质粒可正确表达人LRPl6蛋白.结论:构建的重组质粒pGBKT7-LRP16能够在酵母细胞中正确表达,可作为酵母双杂交系统的诱饵质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵亚力	解放军总医院基础医学所分子生物室	93	443	10.0	17.0
2	韩为东	解放军总医院基础医学所分子生物室	113	744	13.0	23.0
3	伍志强	解放军总医院基础医学所分子生物室	47	114	6.0	9.0
4	杨契	解放军总医院基础医学所分子生物室	3	3	1.0	1.0