miR172超表达载体的构建及其在micro-Tom番茄中的遗传转化

• 作者: 朱本忠 杨永芳 田慧琴 许慧珍 鞠正
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 番茄果实成熟 miR172 克隆 重组载体 转基因植株
• 年，卷（期）: 2014,（33）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 162-167
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

为了进一步阐明miRNA在番茄不同生长发育阶段尤其是在果实成熟阶段的调控途径,利用聚合酶链式反应(PCR)从番茄(Solanum lycopersicum)的cDNA克隆出miR172基因核心片段,将该基因片段,以及pCAMBIA 1300-221载体通过特异性的限制性内切酶双酶切,然后将miR 172片段正向连接到载体上,转化大肠杆菌Trans5α,鉴定重组质粒正确后,利用冻融法将重组载体转入农杆菌EHA105中.再次回转大肠杆菌验证获得的重组载体,通过PCR以及双酶切鉴定是否符合预期结果,将测序结果与NCBI上的基因序列相比较,同源性高达100％.结果成功构建了适用于番茄农杆菌遗传转化的植物表达载体,继续进行转基因植株的培育和鉴定.为通过miR172基因进一步研究果实成熟衰老机理奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱本忠	中国农业大学食品科学与营养工程学院	73	593	14.0	20.0
2	田慧琴	中国农业大学食品科学与营养工程学院	34	320	10.0	17.0
3	鞠正	中国农业大学食品科学与营养工程学院	4	10	2.0	3.0
4	许慧珍	中国农业大学食品科学与营养工程学院	1	0	0.0	0.0
5	杨永芳	中国农业大学食品科学与营养工程学院	3	0	0.0	0.0