MACC1基因shRNA 慢病毒表达载体的构建及转染MB-231细胞

• 作者: 吕钢 曾真 王亚冬 王婷 甘霖 闵捷
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 结肠癌转移相关基因1 RNA干扰 慢病毒载体 人乳腺癌细胞株MB-231
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 1474-1475,1479
• 页数: 3页
• 字数: 2572字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.12.022

摘要

目的：构建结肠癌转移相关基因1（MACC1）RNAi慢病毒表达载体，并转染人乳腺癌细胞株MB-231，观察其最佳感染条件。方法设计并合成MACC1基因特异性的DNA寡核苷酸，连接到经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中，转化大肠埃希菌DH5a感受态细胞，筛选阳性菌落、扩增后提取质粒，进行DNA测序鉴定。用293FT 细胞包装产生慢病毒，感染MB-231细胞，选择感染效率高、感染复数（MOI）低的感染条件。结果 PCR与测序鉴定证实成功构建了 MACC1 RNAi的慢病毒载体，可以高效转染MB-231细胞，其最佳感染条件为MOI＝40。结论成功构建了MACC1 RNAi慢病毒表达载体，其可高效感染MB-231，为进一步研究靶向 MACC1 RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	甘霖	重庆市中医院乳腺甲状腺科	12	44	4.0	6.0
2	吕钢	重庆市中医院乳腺甲状腺科	17	93	5.0	9.0
3	闵捷	重庆市中医院乳腺甲状腺科	11	51	5.0	7.0
4	曾真	重庆市中医院乳腺甲状腺科	9	24	2.0	4.0
5	王亚冬	重庆市中医院乳腺甲状腺科	16	62	5.0	7.0
6	王婷	重庆市中医院乳腺甲状腺科	17	64	5.0	7.0