克诺罗杆菌检测用单克隆抗体的制备及功效评价

• 作者: 何宇平 吴杨 杨捷琳 杨海荣 潘良文 袁辰刚 陈颖
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 克诺罗杆菌 单克隆抗体 快速检测
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 209-214
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2014.10.039

摘要

目的:选择克诺罗杆菌标准菌株中的多株代表菌株作为抗原,采用多抗原组合免疫的方法,筛选制备抗克诺罗杆菌属(Cronobacter spp.)检测用单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并对获得的抗体进行各项指标评价,为进一步建立克诺罗杆菌免疫学快速检测方法创造条件.方法:采用冻融裂解、超声破碎、全颗粒三种方法制备抗原,以克诺罗杆菌标准菌株及分离菌株20株,9株非克诺罗杆菌进行筛选.筛选获得的抗体鉴定特异性,进行Ig亚类分型,测定效价及相对亲和力常数.结果:获得6株针对克诺罗杆菌的杂交瘤细胞株,腹水效价均在1∶107以上;相对亲和常数均大于1.0×1010L/mol.采用“鸡尾酒法”将多种抗体应用到胶体金试纸条制备上,可获得检测灵敏度为105CFU/mL,特异性较好的试纸条.结论:成功制备了针对克诺罗杆菌的多株单克隆抗体,抗体特异性检测表明,所制备的6株单克隆抗体针对克诺罗杆菌不同的亚种或亚型.利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)和胶体金试纸条检测阪崎肠杆菌的方法.为进一步开发阪崎肠杆菌的免疫检测试纸条,建立快速的检测方法创造条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈颖		152	1036	16.0	21.0
2	杨捷琳		33	146	7.0	10.0
3	潘良文		48	495	13.0	20.0
4	何宇平		30	78	6.0	7.0
5	袁辰刚		13	52	4.0	7.0
6	杨海荣		22	87	6.0	9.0
7	吴杨		1	2	1.0	1.0