牛支原体P48蛋白的表达及间接血凝检测方法的建立与应用

• 作者: 储岳峰 刘永生 潘玮玮 秦明明 简莹娜 贺英 赵萍 逯忠新 陈胜利
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛支原体 重组P48蛋白 可溶性表达 间接血凝试验 抗体检测
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 241-246
• 页数: 6页
• 分类号: S852.62
• 语种: 中文

摘要

优化并合成牛支原体的p48基因,将其克隆到pET-32a(+)表达载体上后,转化大肠杆菌BL21(DE3),16℃低温诱导表达,获得可溶性表达的大小约66 ku的重组P48蛋白.将纯化后的重组P48蛋白致敏戊二醛和鞣酸处理过的绵羊红细胞,建立了检测牛支原体抗体的间接血凝试验.重组P48蛋白致敏红细胞的最佳质量浓度是20～40 μg/mL,牛支原体超免疫血清抗体效价达1∶2 048～1∶4 096.该方法对牛肺疫、牛巴氏杆菌病、牛病毒性腹泻病、布氏杆菌病、结核病、口蹄疫、牛生殖道支原体感染、里奇氏支原体感染、大肠杆菌病阳性血清的检测结果均为阴性.该方法的特异性为100％,敏感性为93.33％.与国外商品化的牛支原体ELISA试剂盒相比,平均符合率为96.15％.对833份田间血清和1 084份乳清进行检测,阳性率分别是15.37％和19.56％.结果表明,该方法敏感性高、特异性强和重复性好,可用于牛支原体抗体水平检测、牛支原体病的辅助诊断和流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘永生	中国农业科学院兰州兽医研究所	24	31	4.0	5.0
2	逯忠新	中国农业科学院兰州兽医研究所	25	168	6.0	12.0
3	赵萍	中国农业科学院兰州兽医研究所	18	121	6.0	10.0
4	储岳峰	中国农业科学院兰州兽医研究所	21	189	7.0	13.0
5	贺英	中国农业科学院兰州兽医研究所	7	22	3.0	4.0
6	陈胜利	中国农业科学院兰州兽医研究所	6	0	0.0	0.0
7	简莹娜	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0
8	秦明明	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
9	潘玮玮	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0