基于四种水产病原弧菌的简型芯片检测体系的优化

• 作者: 曲凌云 朱鹏飞 李壹 王宗灵
• 来源期刊: 海洋科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 弧菌 基因芯片 点样液 优化
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报道
• 页码范围: 257-269
• 页数: 13页
• 分类号: Q503|Q93-332|S917.1
• 字数: 7356字
• 语种: 中文

摘要

基因芯片技术在病原菌检测领域展现出良好的前景，本文依托水产病原菌基因检测芯片的检测体系，以水产常见病原弧菌的 hs p60、to x R基因检测探针为研究对象，系统研究不同点样液配方、寡核苷酸探针浓度、荧光标记物质浓度、杂交温度、杂交时长对芯片杂交效果的影响，并进行相应优化。结果表明，杂交温度为60℃、杂交时长为2 h、探针浓度为1μmol／L、Cy3标记的随机引物的用量为150 pmol时，芯片的经济性、灵敏度、检测效率达到均衡；以0．1 mol／L 磷酸氢二钠和25％二甲基亚砜混合溶液作为点样液，效果较好。优化后的芯片对4种弧菌的检测没有出现交叉杂交现象，探针特异性达到100％；对溶藻弧菌全基因组DNA检测灵敏度为10 fg ，高出PCR方法约2个数量级。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲凌云		29	311	10.0	16.0
2	王宗灵		42	770	16.0	27.0
3	朱鹏飞		3	19	3.0	3.0
4	李壹		2	16	2.0	2.0