戊型肝炎病毒Ch-S-1株全长体外转录载体的构建及表达初步研究

• 作者: 兰添 尹秀英 张诺娜 朱光泽 李一权 李霄 胡宁宁 范园园 邢彬
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 反向遗传学 全长cDNA克隆 表达载体
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1663-1667,1673
• 页数: 6页
• 分类号: R373.2+1
• 字数: 2821字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.12.017

摘要

目的:构建出HEV Ch-S-1株的全长cDNA克隆,并转染至HepG2细胞并对其表达进行初步研究. 方法:利用重叠PCR方法获得HEV Ch-S-1株全长PCR产物;构建体外转录载体pKS-HEV,成功获得HEV基因组RNA,并转染至HepG2细胞,通过RT-nPCR、套式PCR和间接免疫荧光实验检测病毒的表达. 结果:成功构建了HEV基因组全长cDNA体外转录载体pKS-HEV,并证明了该cDNA克隆在HepG2细胞中成功进行了表达. 结论:成功构建了HEV Ch-S-1株全长体外转录载体pKS-HEV,并对其表达进行了初步研究,为将来在分子水平上研究HEV及研发疫苗提供了一些实验基础.