毕赤酵母甲酸脱氢酶在大肠杆菌中的融合表达及其酶学性质

• 作者: 林陈水 蔡礼年 黄春辉
• 来源期刊: 氨基酸和生物资源
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲酸脱氢酶 克隆 定点突变 融合表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 生物资源保护与应用开发
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 2465字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14188/j.ajsh.2015.01.007

摘要

为了获得高效融合表达的甲酸脱氢酶(FDH)工程菌,用PCR方法从毕赤酵母GS115(Pichia pastoris GS115)基因组DNA中克隆FDH基因,测序发现第106位多出一个脱氧腺嘌呤核苷酸,基因定点突变后重组至胞内融合表达型T载体pET-DsbA-T,得到重组质粒pET-DsbA-FDH,转化E.coli BL21(DE3),获得胞内融合表达型FDH工程菌.SDS-PAGE分析表明,融合蛋白表观分子量约为65×103,主要以可溶形式存在于胞内.进一步研究得知,酶的最适温度为54℃,最适pH为8.5;金属离子对酶活有较强的抑制作用,EDTA能增强酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林陈水	浙江工业大学药学院	32	132	7.0	9.0
2	蔡礼年	浙江工业大学药学院	2	1	1.0	1.0
3	黄春辉	浙江工业大学药学院	2	9	1.0	2.0