多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡

• 作者: 卢建民 张珍珍 秦秀虹 郑玥 马翔
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1 核因子-κB 视网膜血管内皮细胞 糖尿病视网膜病变
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 111-115
• 页数: 5页
• 字数: 4550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2015.0030

摘要

目的 探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly(adenosine diphosphate-ribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在高糖人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及作用机制.方法 体外培养人RVEC及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖人RVEC细胞模型.构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,酶切鉴定后转染高糖培养的人RVEC,Western blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,并应用Western blot法和免疫共沉淀法检测高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用.PARP-EGFP和Flag-NF-κB质粒共转染人RVEC,激光共聚焦扫描显微镜检测PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用.结果 人RVEC复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象.成功构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,并有效表达目的基因.免疫共沉淀结果显示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,高糖组NF-κB p50的条带比正常对照组明显增粗,并且高糖情况下PARP-1结合NF-κB的量较正常对照组明显增加.激光共聚焦扫描显微镜结果显示PARP和NF-κB均表达于正常的人RVEC的细胞核和核周区域,当受到高浓度葡萄糖影响后,PARP-1和NF-κB均集中表达于细胞核内,尤以NF-κB最显著.结论 PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,血糖增高时,PARP-1可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的NF-κB,激活NF-κB信号通路,引起RVEC凋亡,导致DR的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马翔	大连医科大学附属第一医院眼科	51	131	6.0	9.0
2	卢建民	大连医科大学附属第一医院眼科	22	62	4.0	6.0
3	秦秀虹	大连医科大学附属第一医院眼科	17	61	4.0	7.0
4	张珍珍	上海交通大学附属上海市第一人民医院眼科	12	28	4.0	4.0
5	郑玥	大连医科大学附属第一医院眼科	2	4	1.0	2.0