小鼠MSTN shRNA设计及其活性检测

• 作者: 杨开典 杨跃飞 祁钰钰 鞠辉明
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 肌肉生长抑制素 shRNA 基因沉默
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: Q754
• 语种: 中文

摘要

根据小鼠肌肉生长抑制素(MSTN)mRNA序列设计4对shRNA序列,通过退火连接到shRNA过表达载体pGPU6/GFP/Neo,构建相应的过表达载体pGPU6/GFP/Neo-MSTN shRNA.转染C2C12细胞后,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)及Western blot试验对shRNA基因沉默后MSTN mRNA及蛋白的表达水平进行检测.结果表明:设计并构建的4个MSTNshRNA过表达载体,在细胞水平都能有效降低MSTN mRNA及蛋白的表达水平,其中转染pGPU6/GFP/Neo-MSTN714载体细胞组基因沉默效率最高,MSTN mRNA和蛋白表达分别下降72％、74％,差异极显著(P＜0.01).该研究成功设计了4个MSTNshRNA序列并构建了相应的高效表达载体,为后续通过调控MSTN表达研究其在肌肉发育中功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鞠辉明		27	67	4.0	7.0
2	杨跃飞		28	81	5.0	8.0
3	杨开典		5	5	1.0	2.0
4	祁钰钰		4	5	1.0	2.0