IL-13和IL-33重组蛋白的原核表达和纯化

• 作者: 叶迎春 年四季 徐文峰 袁青 高燕
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: IL-13 IL-33 重组 表达
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 449-452
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 2819字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2015.05.004

摘要

目的:利用PET101/D-TOPO蛋白表达系统,表达人IL-13和IL-33重组蛋白. 方法:以健康人外周血单个核细胞(PBMC)的mRNA为模板,采用RT-PCR扩增IL-13和IL-33开放阅读框,将扩增所得目的基因连接到质粒pET101/D-TOPO,构建出重组质粒并转化大肠杆菌BL21,诱导其表达IL-13和IL-33重组蛋白,纯化后进行鉴定.结果:RT-PCR扩增所得IL-13 cDNA为490 bp, IL-33 cDNA大小为800 bp,将其分别连接到质粒PET101/D-TOPO,构建出IL-13和IL-33重组质粒,分别转化大肠杆菌BL21,诱导其表达. SDS-PAGE电泳分析,发现目的条带大小分别为29 kDa和35 kDa左右,Western blotting结果证实重组表达正确. 结论:成功构建出IL-13和IL-33重组质粒,成功表达并纯化出IL-13和IL-33重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	年四季	四川医科大学病原生物学教研室	5	4	1.0	1.0
2	叶迎春	四川医科大学病原与免疫实验室	5	4	1.0	1.0
3	袁青	四川医科大学免疫学教研室	5	4	1.0	1.0
4	徐文峰	四川医科大学免疫学教研室	3	4	1.0	1.0
5	高燕	四川医科大学免疫学教研室	1	1	1.0	1.0