α-1抗胰蛋白酶减轻小鼠胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤

• 作者: 周乐亮 夏小林 田磊 糜亮亮 韩小乐 黎沙
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 关键词: 胰岛移植 胰腺外分泌细胞 胰蛋白酶
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 102-107
• 页数: 6页
• 字数: 4504字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2015.02.009

摘要

目的 探讨α-1抗胰蛋白酶(A1AT)减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及促进胰岛β细胞增殖.方法 (1)体外实验:选10只BALB/c小鼠,挑取所有的胰岛并收集胰腺外分泌细胞.纯化胰岛组(n=6),每孔100个胰岛,常规培养;实验组(n=6),每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养,并加入A1AT(0.5 mg/ml);对照组(n=6),每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养.48 h后,收集各孔上清液,分别检测胰岛素含量及胰蛋白酶浓度;然后分别换低糖、高糖RPMI-1640培养液,行胰岛素释放实验.(2)体内实验:链脲佐菌素腹腔注射诱导BALB/c小鼠成为糖尿病小鼠.实验组(n=10)和对照组(n=10)分别于小鼠左肾被膜上下级同时移植胰岛细胞250个和等体积的胰腺外分泌细胞,术后实验组按腹腔注射A1AT 83 mg/kg(28 d),对照组注射等量生理盐水(28 d),同时两组小鼠分别按0.5μg/g腹腔注射EDU(28 d).1个月后切除左肾,免疫组织化学染色法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达,免疫荧光染色法检测移植胰岛β细胞增殖情况,并继续检测血糖.结果 (1)纯化胰岛组胰岛素含量为(1.53±0.33) μg/孔,实验组为(1.26±0.13) μg/孔,对照组为(0.82±0.24) μg/孔,各组间的差异均有统计学意义(P＜0.01).纯化胰岛组胰蛋白酶浓度为(1.05±0.22) ng/ml,实验组为(2.42±0.44) ng/ml,对照组为(5.73±1.12) ng/ml,各组间的差异均有统计学意义(P＜0.01).纯化胰岛组胰岛素刺激指数为4.11±1.45,实验组为2.53±1.52,对照组为1.32±1.12,各组间的差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)胰岛移植后,实验组和对照组血糖均降至正常,对照组较实验组血糖恢复正常时间延迟,组间差异有统计学意义(P＜0.05).切除两组小鼠左肾3d后,两组小鼠随机血糖均＞21 mmol/L.对照组移植物周围可见大量抗淀粉酶抗体阳性颗粒,实验组较对照组明显减少.免疫荧光检测显示实验组移植胰岛Insulin+/EDU+β细胞数较对照组明显增多.结论 (1)胰岛细胞与胰腺外分泌细胞在体外共同培养时加入A1AT可以缓解胰腺腺泡细胞分泌的蛋白酶对胰岛的破坏.(2)胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植在糖尿病小鼠体内,腹腔注射A1AT可以明显减少腺泡细胞胰蛋白酶的分泌,减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤,促进胰岛β细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田磊	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	34	87	6.0	7.0
2	黎沙		3	16	1.0	3.0
3	夏小林	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	5	11	2.0	3.0
4	韩小乐	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	4	11	2.0	3.0
5	糜亮亮	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	4	11	2.0	3.0
6	周乐亮	广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科	2	3	1.0	1.0