重组β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性的半理性改造

• 作者: 吕波 普鸿丽 李春 赵东旭
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: β-葡萄糖醛酸苷酶 单葡萄糖醛酸基甘草次酸 键专一性 定点饱和突变
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1119-1128
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.140595

摘要

为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对键选择进行筛选,得到优势突变酶R329K、T369V.结果显示:与PGUS-E酶相比,突变酶R329K、T369V键选择性分别提高26.9％、34.3％.突变酶的酶学性质研究表明,突变酶的最适pH和温度与PGUS-E一致,但其酶催化效率下降.由此可见,R329、T369对酶催化的键选择性和酶的活性有显著影响.综上结果,本文应用饱和突变方法改善了PGUS-E的键选择性,为酶的结构和功能关系理解提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕波	北京理工大学生命学院	18	104	6.0	10.0
2	李春	北京理工大学生命学院	106	629	13.0	20.0
3	赵东旭	北京理工大学生命学院	37	191	8.0	13.0
4	普鸿丽	北京理工大学生命学院	1	0	0.0	0.0