猪肺炎支原体P97基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

• 作者: 刘艳芬 刘铀 杨青春 王凯 陈绍红
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 黏附因子 重组腺病毒载体 疫苗
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1114-1121
• 页数: 8页
• 分类号: S852.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2015.11.003

摘要

采用PCR扩增了猪肺炎支原体(Mhp)R659株黏附因子P97基因,测定了其核苷酸序列,并将其克隆至穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA上.在脂质体介导下将Pac Ⅰ酶线性化的重组穿梭质粒pacAd-P97和腺病毒骨架质粒pacAd5 9.2-100共转染AD-293细胞,包装出重组腺病毒Ad-P97,用RT-PCR、Western-blot和间接免疫荧光试验检测重组P97蛋白在AD-293和PK15细胞中的表达.之后,用Ad-P97抗血清检测Mhp对宿主细胞的黏附作用以及Ad-P97在仔猪体内的免疫应答反应.结果显示,P97基因由3 339个核苷酸组成,共编码1 113个氨基酸,其核苷酸序列高度保守;重组P97蛋白可在Ad-P97感染的AD-293细胞和PK15细胞中高效表达,但Ad-P97不能在PK15细胞中增殖并引起细胞病变;Ad-P97具有良好的免疫原性,能抑制Mhp对PK15细胞的黏附作用,诱导免疫仔猪产生Mhp凝集抗体.上述结果为进一步研制安全、高效的Mhp重组疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘艳芬		73	409	12.0	17.0
2	刘铀		59	184	7.0	11.0
3	陈绍红		48	146	7.0	11.0
4	王凯		10	65	5.0	8.0
5	杨青春		5	40	3.0	5.0