沙眼衣原体pORF5质粒蛋白激活NALP3炎性复合体诱导THP-1细胞产生IL-1β和IL-18

• 作者: 周洲 唐双阳 戴文婷 曹文娟 李忠玉 杨晓玉 粟盛梅 贺红梅 龚思露
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白 NALP3炎性复合体 IL-1β IL-18
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 590-594
• 页数: 5页
• 分类号: R374+.1
• 字数: 4016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.05.003

摘要

目的：探讨沙眼衣原体（ Chlamydia trachomatis，Ct） pORF5质粒蛋白对IL-1β和IL-18等促炎性细胞因子的诱生作用，并初步分析其分子机制。方法：用0、3、6、12、24、36μg／ml不同浓度的pORF5蛋白刺激THP-1细胞，并于0、8、16、24、36 h收集上清及细胞，ELISA检测IL-1β和IL-18的含量；Realtime-PCR检测NALP3炎性复合体mRNA表达水平，Western blot鉴定Caspase-1活化状态；分别用NALP3 siRNA、ASC siRNA 转染THP-1细胞24 h或用Caspase-1特异性抑制剂（ Z-YVAD-FMK）预处理THP-1细胞30 min后，再用24μg／ml的pORF5质粒蛋白刺激THP-1细胞24 h，ELISA分析各处理因素对IL-1β和IL-18产生的影响。结果：pORF5质粒蛋白以浓度依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β和IL-18。当pORF5质粒蛋白浓度为24μg／ml时，IL-1β和IL-18的表达水平最高，分别为491 pg／ml、186 pg／ml；同时pORF5质粒蛋白以时间依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β和IL-18，两者分别在24 h和16 h达到峰值。 pORF5质粒蛋白可增强THP-1细胞NALP3、ASC 和Caspase-1 mRNA的表达，促进Caspase-1的活化；NALP3-siRNA、ASC-siRNA及Caspase-1抑制剂处理组IL-1β和IL-18的产生水平均显著低于对照组（ P＜0.05）。结论：pORF5质粒蛋白通过激活NALP3炎性复合体诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18。