奶山羊催乳素受体基因CDS区的克隆和序列分析与腺病毒干扰载体的构建

• 作者: 王紫骞 罗军 赵旺生 邱思源
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 催乳素受体 克隆 腺病毒 shRNA 奶山羊
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧生物技术
• 页码范围: 56-61
• 页数: 6页
• 分类号: S827.2
• 字数: 4300字
• 语种: 中文

摘要

本文旨在克隆奶山羊催乳素受体(PrlR)基因CDS序列,在此基础上构建针对奶山羊PrlR的腺病毒干扰载体,为研究PrlR在奶山羊乳腺乳脂合成代谢中的功能与调控作用提供有效的RNA干扰工具.首先从西农萨能羊乳腺组织RNA中扩增得到完整CDS区序列,其CDS长为1 746 bp,包含581个氨基酸序列,GenBank登录号为JF966783;测序后进行序列分析和功能预测,奶山羊PrlR基因CDS区与其他反刍动物相应序列具有较高的同源性,其跨膜区为第236～258位氨基酸;然后根据测序得到的CDS序列,在线设计合成奶山羊PrlR的shRNA序列并成功构建重组干扰腺病毒载体;将这些载体在293细胞系中进行包装和扩繁,最终获取高滴度的腺毒,使用TCID50法检测病毒滴度为5.19× 108 PFU/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗军	西北农林科技大学动物科技学院	91	625	13.0	20.0
2	赵旺生	西北农林科技大学动物科技学院	10	69	3.0	8.0
3	邱思源	西北农林科技大学动物科技学院	3	3	1.0	1.0
4	王紫骞	西北农林科技大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0