表达结核特异性 Vγ9 Vδ2 TCR 双链单体的果蝇 S2恒定细胞系的构建和鉴定

• 作者: 孟繁荣 张洁 方毅敏 杨芳芳 涂晓欣 赖小敏
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: γδT细胞受体 双链单体 S2细胞
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.01.005

摘要

目的：转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌V γ9Vδ2 T细胞受体（ TCR）双链单体的果蝇S2恒定细胞系。方法利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT／V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT／V5-His A质粒、pMT／Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中，用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体，并加以鉴定。结果斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有V γ9Vδ2 TCR单体，且已被成功生物素化。结论成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9 V δ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系，为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。