多用途树种无患子 ISSR-PCR 体系建立与检测

• 作者: 刁松锋 姜景民 栾启福 邵文豪
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 农学
• 关键词: 无患子 ISSR PCR 反应体系 正交设计
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 899-904
• 页数: 6页
• 分类号: S718.46|Q943
• 字数: 3975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11931/guihaia.gxzw201405042

摘要

无患子(Sapindus mukorossi )是我国长江以南地区传统的重要绿化树种,其果皮富含皂苷,种仁富含油脂,为新型木本油料树种之一。为了获得基于 KOD FX 高保真 DNA 聚合酶试剂盒的无患子 ISSR-PCR 的最佳反应体系,该文采用正交优化设计相结合的方法,研究了引物浓度、dNTPs 浓度、KOD FX 酶、模板 DNA浓度和 Mg2＋浓度对无患子 ISSR-PCR 反应体系的影响,并在此基础上对退火温度进一步优化,最终确立了适合无患子的 ISSR-PCR 反应的最佳体系和程序,即20μL PCR 反应体系中,引物0．5μmol.L-1、dNTPs 0．05 mmol.L-1、KOD FX 酶0．06 U.μL-1、模板 DNA 浓度1．0 ng.μL-1和 Mg2＋1．0 mmol.L-1。当以 UBC841为引物时,PCR 扩增程序为94℃预变性2 min,98℃变性10 s,48．6℃退火30 s,68℃延伸90 s,35个循环,68℃延伸7 min,4℃保存。这一优化的 ISSR-PCR 反应体系的建立,为无患子种质资源的遗传多样性、亲缘关系及遗传结构研究、种质创新与分子辅助育种等奠定了良好的基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	栾启福	中国林业科学研究院亚热带林业研究所	36	355	13.0	17.0
2	姜景民	中国林业科学研究院亚热带林业研究所	89	1320	22.0	30.0
3	邵文豪	中国林业科学研究院亚热带林业研究所	32	368	10.0	18.0
4	刁松锋	中国林业科学研究院亚热带林业研究所	19	254	9.0	15.0