梅花鹿IFN－α基因的克隆与原核表达研究

• 作者: 刘存发 宗颖 曾范利 李哲 王全凯 王晓霞 苏凤艳
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 梅花鹿 IFN-α基因 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: S858.25
• 字数: 4643字
• 语种: 中文

摘要

为研究梅花鹿IFN－α的抗病毒功能和分子机制，根据GenBank中牛IFN－α基因序列（A00145），设计并合成1对引物，以梅花鹿肝脏组织DNA为模板，采用PCR技术扩增梅花鹿IFN－α全基因核苷酸序列。序列分析表明梅花鹿IFN－α基因全长570 bp，编码189个氨基酸，其中含18个氨基酸的信号肽和169个氨基酸的成熟多肽，存在1个潜在跨膜区，基因随不同物种发育进化地位表现出种属间的差异性。在此基础上，合成1对引物，扩增梅花鹿IFN－α成熟肽核苷酸序列，构建pET28a－IFNα原核重组表达质粒并转化至大肠杆菌 BL21（DE3）感受态细胞中。 SDS－PAGE 和Western blotting检测结果表明，在24 kd左右出现特异性蛋白带，表达产物主要为不溶性的包涵体，表达量占菌体总蛋白的34．04％，且表达产物与抗His标签抗体可发生特异性反应。将Ni柱纯化的pET28a－IFNα诱导表达产物复性后，细胞病变抑制法检测表明表达产物具抗病毒活性。研究结果为梅花鹿IFN－α蛋白抗病毒分子机制的研究及抗病毒药物的开发奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾范利	吉林农业大学中药材学院	44	128	6.0	9.0
2	王全凯	吉林农业大学中药材学院	110	700	15.0	21.0
4	宗颖	吉林农业大学中药材学院	38	182	7.0	12.0
5	李哲	吉林农业大学中药材学院	26	130	6.0	10.0
6	苏凤艳	吉林农业大学中药材学院	43	237	8.0	13.0
7	刘存发		8	17	3.0	3.0