长白山梅花鹿鹿茸干细胞S100A4基因克隆及原核表达

• 作者: 兰文峰 刘健博 刘国文 张宇航 李心慰 薛会明 郝景锋
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 梅花鹿 S100A4基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 43-45
• 页数: 3页
• 分类号: S865.42
• 语种: 中文

摘要

为了研究S100A4蛋白在鹿茸发生过程中的生物学功能,构建长白山梅花鹿鹿茸S100A4基因原核表达载体,并进行BL21原核表达;自鹿茸骨膜中提取总RNA,逆转录成cDNA,以特异性引物扩增S100A4,扩增产物克隆到pMD18-T载体并测序鉴定,将目的片段和原核表达质粒pET-15b分别用BamHI和Hind Ⅲ双酶切并连接,再将重组质粒转入BL21用TPIG进行诱导表达;结果通过序列的对比分析,S100A4基因是一个相对保守的基因,与多个物种的匹配度达到90％,与牛S100A4基因同源性最高,达到98.4％;成功构建了pET15b-S100A4表达质粒,转化BL21诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测显示表达的蛋白分子量为11 kD,与预期一致.表明梅花鹿鹿茸干细胞S100A4基因的可以在原核中克隆、分析和表达,为真核表达和进一步的蛋白功能分析奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘国文	吉林大学动物医学学院	134	438	10.0	13.0
2	李心慰	吉林大学动物医学学院	30	91	5.0	8.0